DB21/T 4134-2025 水质 喹诺酮类、磺胺类、β-内酰胺类和氯霉素类抗生素的测定 直接进样液相色谱-质谱法

辽宁省地方标准 DB21/T 4134-2025 主要内容总结

1. ​适用范围​

• ​检测对象​：地表水、地下水、生活饮用水中4大类13种抗生素：
  • ​喹诺酮类​：诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、培氟沙星
  • ​磺胺类​：磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑
  • ​β-内酰胺类​：阿莫西林
  • ​氯霉素类​：氯霉素、氟苯尼考
• ​方法性能​：直接进样/液相色谱-质谱法（LC-MS），检出限0.005~0.009 μg/L，测定下限0.020~0.036 μg/L。

2. ​方法原理​

• ​样品处理​：水样经0.22 μm滤膜过滤，直接进样，无需富集或衍生化。
• ​分析技术​：
  • ​液相色谱​：五氟苯基F5色谱柱（100 mm×2.6 mm, 3 μm），梯度洗脱（乙腈-甲酸水）。
  • ​质谱​：电喷雾离子源（ESI±），多反应监测（MRM）模式，内标法定量。

3. ​关键试剂与材料​

• ​标准物质​：13种目标化合物纯度≥99%，内标物包括磺胺甲基嘧啶-¹³C₆、环丙沙星-D8等。
• ​溶液配制​：
  • ​标准贮备液​：100 mg/L（乙腈配制），保存期限5~20天（不同化合物差异）。
  • ​内标使用液​：10.0 μg/L（现用现配）。
• ​抗干扰试剂​：EDTA-2Na（消除金属离子）、抗坏血酸（消除余氯）。

4. ​样品采集与保存​

• ​采样瓶​：500 mL棕色玻璃瓶，预加EDTA-2Na（250 mg）、甲酸（500 μL）、抗坏血酸（50 mg）。
• ​保存条件​：4℃避光冷藏，48小时内完成分析。

5. ​分析步骤​

• ​试样制备​：过滤后取1.0 mL，加入10.0 μL内标使用液。
• ​仪器条件​：
  • ​液相色谱​：柱温40℃，流速0.4 mL/min，进样量50 μL。
  • ​质谱参数​：离子源温度550℃，气帘气/喷雾气/辅助气压力优化，MRM离子对见表2。
• ​校准方法​：标准曲线法（5~6浓度点）或平均相对响应因子法（RRF计算）。

6. ​结果计算与质量控制​

• ​定性确认​：保留时间偏差<2.5%，离子丰度比符合表3最大允许偏差。
• ​定量计算​：内标法，标准曲线相关系数≥0.995，或RRF相对标准偏差≤20%。
• ​质量控制​：
  • ​空白试验​：每批次至少1个实验室空白和全程序空白。
  • ​精密度​：平行样相对偏差≤40%。
  • ​准确度​：基体加标回收率60%~140%。

7. ​方法验证​

• ​精密度​：实验室内RSD 3.0%~11%，实验室间RSD 0.58%~14%，重复性限0.003~0.121 μg/L。
• ​正确度​：加标回收率83.0%~117%（详见附录B）。

8. ​附录信息​

• ​附录A​：13种目标物的检出限（0.005~0.009 μg/L）和测定下限（0.020~0.036 μg/L）。
• ​附录B​：精密度与正确度数据，涵盖地表水、地下水的多实验室验证结果。

9. ​其他要求​

• ​废物处置​：实验废液分类收集，委托有资质单位处理。
• ​标准实施​：适用于辽宁省水质监测，其他地区可参考。

关键注意事项

1. ​保存期限​：不同抗生素标准贮备液保存时间差异大（如阿莫西林仅5天），需严格遵循。
2. ​内标选择​：每类抗生素对应特定内标（如氯霉素-D5用于氯霉素类），确保定量准确性。
3. ​抗干扰措施​：EDTA和抗坏血酸需在采样时加入，避免金属离子和余氯影响。
4. ​色谱柱选择​：五氟苯基F5色谱柱对多类别抗生素分离效果关键，需定期维护。

该标准通过优化前处理和分析条件，实现了水样中多类别抗生素的高灵敏度检测，为环境监测提供了可靠的技术依据。